مقدمه:

اساس عملکرد میکروسکوپ الکترونی عبوری (Transmission Electron Microscope ) که به اختصار به آن TEM گویند، مشابه میکروسکوپ‌های نوری است با این تفاوت که بجای پرتوی نور در آن از پرتوی الکترون استفاده می‌شود. آنچه که می‌توان با کمک میکروسکوپ نوری مشاهده کرده بسیار محدود است در حالی که با استفاده از الکترون‌ها بجای نور، این محدودیت از بین می‌رود. وضوح تصویر در TEM هزار برابر بیشتر از یک میکروسکوپ نوری است. با استفاده از TEM می‌توان جسمی به اندازه چند انگستروم (^{10 –}10 متر) را مشاهده کرد. برای مثال می‌توانید اجزای موجود در یک سلول یا مواد مختلف در ابعادی نزدیک به اتم را مشاهده کنید. برای بزرگنمایی، TEM ابزار مناسبی است که هم در تحقیقات پزشکی، زیست شناسی و هم در تحقیقات مرتبط با مواد قابل استفاده است. در واقع TEM نوعی پروژکتور نمایش اسلاید در مقیاس نانو است که در آن پرتویی از الکترون ها از تصویر عبور داده می‌شود. الکترون‌هایی که از جسم عبور می‌کنند به پرده‌ی فسفرسانس برخورد کرده و سبب ایجاد تصویر از جسم بر روی پرده می‌شوند. قسمت‌های تاریک‌تر بیانگر این امر هستند که الکترون‌های کمتری از این قسمت جسم عبور کرده‌اند (این بخش از نمونه چگالی بیشتری دارد) و نواحی روشن‌تر مکان‌هایی هستند که الکترون از آنها عبور کرده است (بخش‌های کم چگال تر).

وضوح این میکروسکوپ 2/0 نانومتر است که در حد اتم است (بیشتر اتم‌ها ابعادی تقریبا برابر 2/0 نانومتر دارند). با این نوع میکروسکوپ حتی می توان نحوه قرار گرفتن اتم‌ها در یک ماده را بررسی کرد.
از این میکروسکوپ جهت تحلیل و آنالیز ریخت شناسی، ساختار بلوری (نحوه قرارگیری اتم‌ها در شبکه بلوری) و ترکیب نمونه‌ها استفاده می‌شود.

 آماده سازی نمونه:

معمولاً آماده‌سازي ذرات براي مطالعه به وسيله TEM   به دو روش صورت مي گيرد:

          1- فروبردن گريد (grid) در نمونه پودري

          2- افزودن يك قطره از محلول معلق نانو ذرات بر روي گريد.

          ■ در اين مورد گاهي اوقات نمونه قبل از آماده‌سازي تحت محیط التراسونیک قرار گرفته تا ذرات مجزا از هم توليد شود.

          ■ اگر نانو ذرات بوسيله عوامل سطحی از هم مجزا شده باشند،  بايد به گونه‌ای این عوامل را از ذرات جدا نمود، زیرا در غير اين صورت بيم الكتروني با آنها بر هم كنش کرده و باعث ايجاد مشكلاتي براي ستون خلا می‌گردد.

جزییات آماده‌سازی نمونه:

در TEMنمونه ای که می خواهید بررسی کنید باید چگالی آن به حدی باشد که اجازه دهد تا الکترونها تا حدی از آن عبور کنند. راه های مختلفی برای تهیه این نوع نمونه وجود دارد. می‌توانید برش‌های بسیار نازک از نمونه مدنظر تهیه کنید و آن را در یک پلاستیک ثابت نمایند یا اینکه آنرا منجمد کنید. روش دیگر تهیه نمونه ایزوله کردن نمونه و مطالعه محلولی از مولکول ها یا ویروس های مورد نظر با کمک TEM است. 

همچنین می توان نمونه را با روش‌های مختلف رنگ کرد و با استفاده از نشانه گذاری آنرا مطالعه کرد. برای مثال، فلزات سنگین رنگ شده مانند اورانیوم و سرب الکترون های را به خوبی متفرق می‌کنند و کنتراست نمونه را در زیر میکروسکوپ بهبود می بخشند. در ادامه روش تهیه دو نمونه برای مطالعه آنها با TEM آورده شده است:
1. تهیه برش با کمک مواد در برگیرنده: مواد زیستی شامل مقادیر آب می باشند. به علت این برای استفاده از TEM باید کار در خلاء انجام شود لازم است تا آب به گونه ای تبخیر و یا جداسازی شود (با کمک الکل یا استون) و در نهایت نمونه ثابت می شود. حال نمونه در پلاستیکی محصور می شود (به شکل یک بلوک پلاستیکی سخت) و سپس برشهای نازکی از آن به کمک چاقوی الماس مربوط به دستگاه اولترامیکروتوم (برای ایجاد برش های بسیار ظریف) تهیه می شود که تنها 50-100 نانومتر ضخامت دارند. برش‌های تهیه شده روی یک توری مسی قرار داده می‌شوند و با کمک فلزات سنگین رنگ می‌شوند. حال نمونه بافت آماده مطالعه با کمک پرتوی الکترونی TEM می‌باشد.

2. تهیه نمونه به روش رنگ کردن: در این روش از مواد ایزوله (که می‌توانند برای مطالعه باکتری ها و یا مولکول های ایزوله استفاده شوند) استفاده می شود به این طریق که ابتدا محلول محتوای باکتری روی توری ریخته و با پلاستیک پوشانده می‌شود. محلول نمکی یک فلز سنگین (مانند اورانیوم یا سرب) به آنها اضافه می‌شود. محلول نمکی فلز با مواد ترکیب نمی‌شود اما هاله‌ای را اطراف آن بر روی توری تشکیل می‌دهد. نمونه به صورت یک تصویر منفی در هنگامی که با کمک TEM مورد مطالعه قرار می‌گیرد نمایان می شود.

3.    تكنيك هاي تصوير برداري براي آناليز ذرات:

• تصویربرداری  زمینه روشن (Bright field)
• تصویربرداری زمینه تاریک (Dark field)
• تصویربرداری تفکیک فازی (Phase Contrast Imaging)

4. عملکرد میکروسکوپ: با کمک یک منبع نور در بالای میکروسکوپ ، الکترون ها گسیل و منتشر می شوند. الکترون ها از تیوب خلاء میکروسکوپ عبور می کنند. در میکروسکوپ های نوری از عدسی های شیشه ای برای متمرکز کردن نور استفاده می شود در حالی که در TEM از عدسی های الکترومغناطیسی استفاده می شود تا الکترون های را جمع و متمرکز ساخته به صورت یک پرتوی باریک گسیل نماید. این پرتوی الکترونی از نمونه عبور داده می شود. بسته به چگالی مواد، الکترون ها ممکن است از بخش هایی از جسم بگذرند و به صفحه فلورسانس برخورد نمایند و تصویر سایه مانندی از نمونه ایجاد کنند که میزان تیرگی بخش های مختلف جسم به چگالی مواد در ان بخش ها وابسته است. هر چه جسم کم چگال تر باشد تصویر تیره تر خواهد بود. این تصویر می توان مستقیما توسط اپراتور مطالعه شود و یا با کمک یک دوربین تصویر برداری شود.

برای ثبت سفارش، طبق دستورالعمل زیر اقدام نمایید:

1. پس از ثبت نام در سایت، با اکانت خود در سایت وارد شوید و از طریق بخش خدمات آنالیز، نوع آنالیز خود را انتخاب نمایید.

2. آنالیز انتخابی را به سبد خرید خود اضافه نمایید. (با توجه به آنکه قیمت پیش فرض تعیین شده برای یک نمونه می­ باشد، اگر تعداد نمونه شما بیشتر از یک نمونه است قبل از افزودن به سبد خرید، تعداد را به تعداد مورد نظر ارتقا دهید.)

3. پس از تکمیل فرایند خرید، واریز وجه از طریق درگاه بانکی و دریافت شماره پیگیری، فرم تخصصی سفارش خدمات آنالیز را تکمیل و امضا نمایید، سپس به همراه نمونه خود به آدرس ذیل ارسال کنید. ضمنا خواهشمند است نسخه الکترونیکی این فرم را به صورت فایلWord ، به آدرس @nanoBAZARservice تلگرام نمایید. اگر اصل نمونه خود را پس از انجام آنالیز نیاز ندارید در فرایند خرید گزینه “ارسال الکترونیکی- ویژه‌ی خدمات و آنالیزهای تخصصی” را انتخاب نمایید و اگر نیاز به دریافت نمونه دارید گزینه “هزینه‌ی بازگرداندن نمونه- ویژه‌ی خدمات و آنالیزهای تخصصی” را انتخاب نمایید.

شایان ذکر است به دلیل اینکه فرم تکمیلی شما برای کارشناس دستگاه ارسال می شود کلیه ی توضیحات خود را در قالب همین فرم مطرح بفرمایید و از ارسال پیام و یا تماس تلفنی برای اضافه کردن نکات جدا خودداری نمایید.

«تهران- صندوق پستی 316-13445 منطقه 13 پستی به نام خانم فرهنگ آذر (دقیقا این عبارت در آدرس گیرنده روی پاکت درج شود).»

4. بعد از ارسال نمونه لطفا زمان ارسال را به آیدی @nanoBAZARservice اعلام نمایید.

5. پس از انجام آنالیز مربوطه، نتیجه آنالیز به ایمیلی که در پروفایل ثبت نام شما وجود دارد، ارسال و بنا به درخواست اولیه شما اصل نمونه ارسال و یا امحا می­گردد.

** درخواست‌های خارج از فرم را می‌توانید از طریق شماره‌ “۰۹۳۳۵۰۲۷۸۳۷” و یا ایمیل “Info@nano-bazar.ir” اعلام نمایید.